90年代以来，DNA修饰的金纳米粒子复合探针，即球状核酸（Spherical Nucleic Acids），因其在体内外检测、细胞转染、基因调控、生物诊断和纳米结构组装等方面的独特优势，已被广泛用于疾病诊疗等领域。在以往的球状核酸组装研究中，通常策略为加入DNA单链后直接退火致使表面接枝互补序列的球状核酸聚集，从而实现对特定DNA目标序列的检测。
中国科大中科院软物质化学重点实验室梁好均教授课题组引入粘性末端协助的DNA链替换反应，通过构建DNA分子机器以诱导球状核酸的聚集反应实现了球状核酸的恒温组装，并据此实现了寡聚核苷酸序列单碱基突变的检测（J. Am. Chem. Soc.2012, 134, 10803;Adv. Mater.2014, 26, 6181）。在之后的研究中他们注意到，受限于表面接枝DNA的序列特异性，球状核酸复合探针只能针对特定的DNA目标序列进行检测，从而使检测的复杂程度和成本大大提高，降低了其实用性。针对该问题，梁好均教授课题组在前期工作基础上，借助DNA催组装领域动态网络概念，构建了DNA链替换循环体系与球状核酸组装的二级串联网络，进而实现了对两种球状核酸的组装（图1）。
图1 两级DNA链替换反应网络实现DNA-金纳米颗粒组装原理示意图
通过进一步的理论分析和设计，他们对新建立的复杂体系进行了优化。研究结果表明，该方法在单核苷酸动态多样性检测方面表现出比前期策略更好的区分度。一条含有22个碱基的DNA寡聚核苷酸序列，无论在任何位点发生单碱基突变、插入或者缺失，都可通过正常链和突变链的DNA链替换反应速率所造成球状核酸组装速率的差异而进行有效地识别（图2）。该方法更大的优势在于不需要针对特定的DNA目标链检测进行重新设计合成球状核酸复合物，从而大大节省了资金和时间成本。本策略所采用的方法操作简单，不依赖于复杂昂贵的仪器设备，方便癌症等与基因突变相关的疾病早期诊断。此外，该方法也有望应用于复杂多组份DNA纳米器件和DNA组装结构构建等研究领域。
图2 DNA链替换循环网络诱导的球形核酸组装策略在区分单核苷酸动态多样性检测中的应用
该工作已经在J. Am. Chem. Soc.上在线发表，实验部分由博士生姚东宝等人完成，理论部分由特任副研究员肖石燕博士完成。该工作得到了国家基金委、科技部和能源材料化学协同创新中心的支持。
附论文链接： http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jacs.5b07453
（化学与材料科学学院）